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江苏集萃药康生物科技股份有限公司
入驻年限：7 年
- 联系人：
药康生物
- 所在地区：
江苏 南京市 浦口区
- 业务范围：
抗体、细胞库 / 细胞培养、技术服务、试剂、耗材、实验室仪器 / 设备
- 经营模式：
生产厂商 代理商 科研机构
公司新闻/正文
手把手教你解决PCR实验（基因扩增实验）气溶胶污染问题
890 人阅读发布时间：2023-03-20 17:02
为什么我的试剂全换新了，还是一样的结果?
少量鉴定时结果很好，一旦提高样品数量污染又出现了?
之前常听说气溶胶污染，难道是它?
我们一起看看时下大火的ChatGPT怎么说
听完还是迷迷糊糊的~还是请我司的鉴定大神来为我们解惑吧！
另外，由于这类游离的气溶胶核酸片段含量极低，一般对于大片段的PCR扩增影响较小，所以通常出现在PCR产物为80-500bp的PCR反应中哦。
3.更换PCR扩增区域，将扩增片段控制在700-800bp左右；
4.推荐使用降落PCR程序（Touch Down，简称TD）进行扩增，TD程序由于前面的循环使用较高的退火温度富集产物，对于解决污染、非特异性扩增、引物二聚体等问题有非常好的效果。
2、控制实验室环境：保持每天至少4个小时的通风（气溶胶污染尤其高发在冬夏开空调时期）；
3、紫外照射：常规实验结束后，可设置紫外定时照射，每天照射2h，并注意开窗通风以避免富集臭氧。
少量鉴定时结果很好，一旦提高样品数量污染又出现了?
之前常听说气溶胶污染，难道是它?
我们一起看看时下大火的ChatGPT怎么说
听完还是迷迷糊糊的~还是请我司的鉴定大神来为我们解惑吧！
什么是PCR实验室气溶胶污染？
PCR扩增中的气溶胶污染一般指的是DNA/RNA气溶胶污染，是实验室中极易出现的一种空气污染。比如离心机离心、反应管剧烈摇动、PCR开盖和移液器反复吸样时，均会产生游离于空气中的小片段核酸，当它们附着在空气中的尘埃上时，就形成了我们常说的核酸气溶胶。怎么判断PCR实验出现了气溶胶污染呢？
如果已经排除了体系污染和样品间交叉污染，但是以去离子水为模板依然可以扩增出目的条带，那就很有可能存在气溶胶污染了哦。如果出现这类PCR扩增假阳性的话，我们就不能正确判断小鼠的基因型啦！另外，由于这类游离的气溶胶核酸片段含量极低，一般对于大片段的PCR扩增影响较小，所以通常出现在PCR产物为80-500bp的PCR反应中哦。
pcr实验室气溶胶污染处理方案
为了消灭气溶胶污染，我们可以做两方面努力：一是消除PCR污染；二是长期维护实验室环境整洁。一、PCR污染规避措施：
1.在负压实验室、超净台、通风橱进行PCR实验；
2.更换新的试剂和耗材，如引物、酶、去离子水和EP管等；3.更换PCR扩增区域，将扩增片段控制在700-800bp左右；
4.推荐使用降落PCR程序（Touch Down，简称TD）进行扩增，TD程序由于前面的循环使用较高的退火温度富集产物，对于解决污染、非特异性扩增、引物二聚体等问题有非常好的效果。
二、实验室环境维护方面：
1、保持良好的实验习惯：在PCR实验前，使用75%乙醇擦拭桌面和移液器；DNA提取、引物溶解、PCR体系配置时，尽量避免剧烈震荡，轻柔开合EP管；如发生样品飞溅时，使用75%乙醇至少擦拭桌面两次；2、控制实验室环境：保持每天至少4个小时的通风（气溶胶污染尤其高发在冬夏开空调时期）；
3、紫外照射：常规实验结束后，可设置紫外定时照射，每天照射2h，并注意开窗通风以避免富集臭氧。